關于SPE正相和反相萃取，你真的了解嗎？

固相萃取（Solid Phase Extraction，簡稱SPE），也稱固相提取，是一種基于液-固色譜分離，對目標化合物可以進行選擇性吸附、選擇性洗脫的前處理技術。根據其保留機制，作用力主要分為非極性相互作用、極性相互作用、離子交換作用（靜電吸引力）。

離子交換小柱針對的是可解離的帶電物質，在農殘、獸殘的分析中，使用居多的還是正相萃取和反相萃取小柱。今天小編就帶大家詳細地了解一下正相萃取和反相萃取。

反相作用機理

反相模式是指SPE小柱固定相極性小于流動相極性的分離模式。主要是利用固定相官能團的碳氫鍵與目標化合物的碳氫鍵之間的非極性作用力，適用于從極性基質中萃取分離非極性到中等極性的目標物。

對于通過非極性作用力吸附在反相SPE柱上的目標物，可以用弱極性的溶劑洗脫，如氯fang、環己烷、乙酸乙酯等。只要溶劑的洗脫強度足以破壞目標物與吸附劑之間的范德華力，就可以將目標物從SPE柱上洗脫下來。即便是極性較強的甲醇，對于許多化合物來說也具有足夠的非極性作用力將其洗脫。有時單一溶劑不能把疏水性強的目標物*洗脫下來，則可考慮使用二氯甲烷：乙酸乙酯（1：1，體積比）。

反相模式下，溶劑體系的極性應按照樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序逐漸降低，而它們的洗脫強度逐漸增大。必須保證選擇的樣品溶劑不能將目標物洗脫，選擇的淋洗液應在不洗脫目標物的前提下大限度地洗脫干擾物，所選洗脫液應能恰好*洗脫目標物。

正相作用機理

正相模式是指SPE小柱固定相極性大于流動相極性的分離模式。主要是利用：

固相萃取材料極性表面與目標物極性官能團之間的極性相互作用。極性作用力的強度比非極性作用力要大，但比離子作用力小。常見的極性官能團包括羥基、胺基、巰基等。弱極性的基質環境有利于極性作用力的形成，因為弱極性溶劑沒有能夠與極性固定相形成氫鍵的官能團。因此，在SPE的正相萃取中，樣品基質多為弱極性的，如正己烷、二氯甲烷、菜油等，而目標物大多含有極性官能團。

常見的極性固定相有：硅膠，氧化鋁，弗羅里硅土及含有氰基（CN）、氨基（NH₂）、二醇基（2OH）的鍵合硅膠。

正相模式下，溶劑體系的極性應按照樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序逐漸升高，它們的洗脫強度也逐漸增大。必須保證選擇的樣品溶劑不能將目標物洗脫，選擇的淋洗液應在不洗脫目標物的前提下大限度地洗脫干擾物，所以洗脫液應能恰好*洗脫目標物。

那么面對反相、正相固相萃取，在實際應用中我們該選哪一個呢？下面小編就為大家做一個具體的分析。

由于大多數化合物具有多種官能團，在實際操作中，主要根據目標物和干擾物的性質來考慮采用哪種萃取機理。如：2-萘胺是一種弱堿性化合物（pKa=4.16），在一定pH條件下可以呈陽離子態，該化合物又同時具有疏水和親水基團。這時，可以根據樣品基質來選擇有利于將目標物與干擾物分離的萃取機理。當目標物處于弱極性的樣品基質中，此時可利用極性相互作用，選擇正相萃取模式；若處于極性的樣品環境，可利用非極性相互作用，選擇反相萃取模式。此外，還可以將萃取環境的pH調節到低于目標物pKa兩個pH單位，即pH=2.16，采用陽離子交換機理。下面總結了影響保留機制選擇的主要因素：

保留機制D一影響因素：目標物官能團的性質

保留機制第二影響因素：樣品基質的性質

通過以上內容，關于固相萃取模式的選擇，相信小伙伴們已經有所了解。此外，月旭科技針對不同的檢測項目，相繼推出硅膠基質的反相、正相、離子交換小柱，以及聚合物基質、無機基質、混合型吸附機理的SPE產品。