進(jìn)出口水產(chǎn)品中亞甲基藍(lán)殘留量檢測(cè)方法

一、適用范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了水產(chǎn)品中亞甲基藍(lán)殘留量測(cè)定的高效液相色譜檢測(cè)方法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于魚、蝦及其制品中亞甲基藍(lán)殘留的測(cè)定和確證。（本實(shí)驗(yàn)樣品為龍利魚）
參考標(biāo)準(zhǔn)：《SN 1974-2007 進(jìn)出口水產(chǎn)品中亞甲基藍(lán)殘留量檢測(cè)方法  液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法和高效液相色譜法 》

二、提取步驟

樣品前處理：將樣品經(jīng)攪拌機(jī)攪碎，冷藏保存，備用。
準(zhǔn)確稱取5g魚肉試樣（j確至0.01g）于50mL離心管中，加入5g中性氧化鋁，再依次加入1mL對(duì)甲苯磺酸溶液、4mL乙酸鈉緩沖溶液，渦旋1min。加入8mL乙腈，10000r/min均質(zhì)2min，4000r/min離心5min，將上清液轉(zhuǎn)移到另一個(gè)50mL離心管中，再加入4mL乙腈重復(fù)提取殘?jiān)淮危喜⑸锨逡骸Ｈ缓笤谏锨逡褐屑尤?mL二甘醇溶液，10mL二氯甲烷，渦旋1min，4000r/min離心5min，收集下層有機(jī)層于濃縮瓶中，在40℃下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，加入6mL乙腈溶解殘?jiān)齼艋?/p>

三、凈化步驟

SPE柱：月旭Welchrom® Alumina-N小柱，規(guī)格：500mg/3mL。
活化：3mL乙腈，棄去；
上樣：待凈化液全部上樣，收集；
淋洗：2mL乙腈，收集；
洗脫：4mL甲醇，收集；
濃縮：40℃氮吹至近干后用10%甲醇溶液定容至1mL，過(guò)0.22μm微孔濾膜，供上機(jī)檢測(cè)。

四、色譜條件

高效液相色譜條件
色譜柱：月旭Ultimate® XB-C18 4.6×150mm，5μm；
洗脫程序：梯度洗脫，0min時(shí)，甲醇與0.1%甲酸水體積比為10:90；7min時(shí)，甲醇與0.1%甲酸體積比為95:5；9min時(shí)，甲醇與0.1%甲酸體積比為95:5；12min時(shí)，甲醇與0.1%甲酸體積比為10:90；15min時(shí)，甲醇與0.1%甲酸體積比為10:90；
流速：0.5mL/min；
柱溫：30℃；
進(jìn)樣量：50μL；
檢測(cè)波長(zhǎng)：655nm。

五、色譜圖或者加標(biāo)回收率結(jié)果

六、相關(guān)產(chǎn)品信息