反相離子對試劑什么時(shí)候使用？

離子對試劑是由強(qiáng)親水離子形成，反作用于樣品分子的中性離子對。因此，可用于同時(shí)分離帶電分子和非帶電分子。反相離子對色譜法是把離子對試劑加入到含水流動(dòng)相中，被分析的組分離子在流動(dòng)相中與離子對試劑的反離子生成不帶電荷的中性離子，從而增加溶質(zhì)與非極性固定相的作用，使分配系數(shù)增加，改善分離效果。

一般情況下，在建立HPLC分離方法的時(shí)候，我們推薦由RPC開始，接著添加離子對試劑（僅當(dāng)有需要時(shí)）。舉個(gè)例子，當(dāng)我們已知某個(gè)峰是對應(yīng)一個(gè)酸性物質(zhì)、堿性物質(zhì)或中性物質(zhì)時(shí)，我們便能準(zhǔn)確地預(yù)測出添加的IPC試劑對溶質(zhì)保留的影響。因此，當(dāng)改變RPC的其他條件仍不能達(dá)到合適的分離度時(shí)，我們可以通過使用IPC試劑不斷改變酸性溶質(zhì)和堿性溶質(zhì)的保留行為從而改善他們的分離效果。

那么，IPC在什么時(shí)候或者應(yīng)用于什么物質(zhì)的分離會(huì)是比較合適的分離方法呢？在樣品出現(xiàn)以下特點(diǎn)時(shí)我們就可以考慮使用離子對試劑：

（1）在反相色譜柱上不保留或保留弱；

（2）化合物帶有強(qiáng)離子官能團(tuán)，如羧基、銨基、氨基等；

（3）化合物在反相體系流動(dòng)相中有足夠的溶解度。

使用離子色譜法可令樣品的保留行為產(chǎn)生類似于改變流動(dòng)相的pH的變化，但是離子對色譜法能更好的控制酸性溶質(zhì)或堿性溶質(zhì)的保留行為，而且無須使用ji端的流動(dòng)相pH（如，pH＜2.5或pH＞8.0）。