疏水層析簡(jiǎn)介

疏水層析是根據(jù)分子表面疏水性不同來分離生物大分子的一種方法，和反相層析分離物質(zhì)的依據(jù)是一致的，都是利用疏水介質(zhì)的疏水性配基與流動(dòng)相中的一些疏水分子發(fā)生可逆性結(jié)合而進(jìn)行分離。根據(jù)蛋白質(zhì)的疏水性差異，在高鹽溶液中，蛋白質(zhì)會(huì)與疏水配基相結(jié)合，而其他的雜蛋白則沒有這種性質(zhì)，可以將蛋白質(zhì)初步的分離，用于蛋白質(zhì)鹽析之后的進(jìn)一步提純。

1. 采用了鹽的水溶液作為流動(dòng)相，色譜條件溫和，生物大分子的活性回收率很高。

2. 蛋白質(zhì)在HIC操作過程中是高鹽上樣，低鹽洗脫（高鹽濃度的樣品不必作處理就可直接上樣）。

3. 在一次色譜中可同時(shí)實(shí)現(xiàn)出去鹽酸胍、蛋白質(zhì)復(fù)性和分離三個(gè)目的。

4. 溫度升高，蛋白質(zhì)天然折疊伸展，暴露出更多內(nèi)部疏水集團(tuán)，使蛋白質(zhì)的HIC保留發(fā)生變化。

5. 色譜填料穩(wěn)定性好，鹽水體系作流動(dòng)相無環(huán)境污染。

一類鹽（如Na₂SO₄、(NH₄)₂SO₄等）可以使溶液中蛋白質(zhì)的構(gòu)象穩(wěn)定，會(huì)促進(jìn)蛋白質(zhì)自身間的疏水作用而析出，或者促進(jìn)蛋白質(zhì)與配基之間的疏水作用而保留在柱上，這類鹽叫鹽析性鹽。鹽析性鹽的摩爾表面張力增量也大（除了有特異作用的鹽如CaCl₂、MgCl₂外）。

有一些鹽，如硫氰酸鹽、鹽酸胍等，會(huì)提高蛋白質(zhì)的水溶性，同時(shí)會(huì)使蛋白質(zhì)變性，這類鹽叫鹽溶性鹽。鹽溶性鹽的摩爾表面張力增量小。

Phenyl/Butyl/Octyl/Butyl-S Tanrose FF

疏水層析介質(zhì)

Phenyl Tanrose 6FF屬于芳香族疏水介質(zhì)，疏水性*。根據(jù)配基取代程度不同分為：高取代（High Sub簡(jiǎn)稱HS）和低取代（Low Sub簡(jiǎn)稱LS）兩種介質(zhì)。苯基通過不帶電，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定的醚鍵連接到瓊脂糖上。

Butyl Tanrose 4FF和Octyl Tanrose 4FF這兩種介質(zhì)屬于脂肪族疏水介質(zhì)，Butyl Tanrose 4FF配基為丁基，Octyl Tanrose 4FF 配基為辛基：這兩種配基通過不帶電且化學(xué)穩(wěn)定性的醚鍵同高度交聯(lián)的瓊脂糖偶聯(lián)而成。

Butyl-S Tanrose 6FF是疏水性最弱的疏水介質(zhì)，適合在較低鹽濃度條件下純化強(qiáng)疏水性分子，可去除脂肪類，脂蛋白，色素等，在酵母重組表達(dá)乙肝疫苗純化過程中發(fā)揮重要作用。